پروتکل آزمایشی
- آماده‌سازی واکنش:
- نمونه RNA را روی یخ ذوب کنید.
- مخلوط واکنش را به شرح زیر آماده کنید:
جزء | حجم (میکرولیتر) |
|---|---|
RNA الگو | تا 1 میکروگرم |
cDNA Synthesis Pre-Mixed (2X) | 10 |
آب عاری از نوکلئاز | تا حجم نهایی 20 |
- انکوباسیون:
- مخلوط را به‌خوبی همگن کرده و در دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۳۰-۶۰ دقیقه انکوبه کنید.
- برای RNA با ساختارهای ثانویه پیچیده، دما را تا ۷۰ درجه سانتی‌گراد افزایش دهید.
- غیرفعال‌سازی آنزیم:
- نمونه را در دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه حرارت دهید.
- ذخیره‌سازی:
- cDNA سنتز‌شده را در فریزر ۲۰- درجه سانتی‌گراد نگهداری کنید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.